E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Phytophthora infestans (Mont) de Bary provoacă boala târzie, o boală periculoasă a cartofilor și roșiilor. Una dintre principalele surse de inocul primar P. infestans sunt structuri reproductive de repaus cu pereți groși - oospori.
Oosporii hibrizi formați ca urmare a încrucișării unor tulpini parentale genetice diferite contribuie la o creștere a diversității genotipice a populației, în urma căreia se accelerează procesul de adaptare a tulpinilor la noi soiuri și fungicide aplicate.
Formarea Oospore P. infestans pe teren a fost remarcat în multe țări ale lumii: Rusia (Smirnov și colab., 1999), Norvegia (Hermansen și colab., 2002), Suedia (Strömberg și colab., 2001), Olanda (Kessel și colab., 2002) și alte regiuni. Oosporii sunt capabili să persiste în sol într-o stare viabilă mai mult de 2 ani (Bødker și colab., 2006) și să provoace infecția plantelor după iernare (Ulanova și colab., 2010; Lehtinen și colab., 2002).
Mai devreme s-a arătat că frunzele plantelor din diferite niveluri ale tufișului de cartof au diferențe de rezistență la boala târzie; crește de la frunzele inferioare la cele superioare. Această tendință nu depinde de vârsta frunzelor, vârsta plantelor sau soiul de cartof (Vesper și colab., 2003). În același timp, nu am reușit să găsim date despre diferențele de intensitate a formării de oospori în frunzele diferitelor straturi ale tufișului de cartofi din literatura de specialitate. Cu toate acestea, dacă există astfel de diferențe, atunci acestea ar trebui luate în considerare atunci când se prelevează probe de frunze pentru analiza formării de oospori și atunci când se interpretează rezultatele obținute de alți autori. Scopul acestei lucrări a fost studierea formării de oospori în frunzele desprinse din diferite straturi ale unei plante de cartofi, plasate în aceleași condiții în camere umede.
materiale si metode
Am folosit 5 izolate P. infestans diferite tipuri de împerechere izolate din probele afectate aduse din regiunile Moscova, Ryazan și Leningrad. Dintre acestea, au fost selectate 3 perechi de tulpini de diferite tipuri de împerechere, oferind oospori abundenți atunci când au fost testați în mediu de ovăz agar.
Pentru testare, am folosit plante de cartof fără virus din următoarele soiuri cultivate într-o seră (într-un substrat de turbă): Sandrin timpuriu, Zorachka, Uladar, Osiris, Ilyinsky mijlociu-timpuriu, Yanka mijlocul sezonului
Frunzele simple de la diferite niveluri ale plantei de cartof au fost selectate pentru analiză. Au fost selectate trei frunze din nivelul inferior (4 frunze compuse inferioare), trei din partea superioară (3-4 frunze compuse deasupra) și trei frunze din centrul tufișului. Frunzele simple au fost cântărite, fotografiate pe hârtie coordonată (pentru a calcula volumul și suprafața) și apoi plasate cu capul în jos pe suprafața apei sterile, turnate 25 ml în cutii Petri. Apoi fiecare frunză a fost infectată cu o picătură dintr-o suspensie mixtă de izolate de zoosporangie A1 și A2 de tipul împerecherii. Pentru trei frunze colectate de la fiecare nivel, a fost utilizat un inocul de trei perechi diferite de izolate. O frunză a fost infectată cu un amestec de inocul dintr-o pereche de izolate.
Pentru a prepara o suspensie de zoosporangie, izolate de diferite tipuri de împerechere au fost cultivate pe mediu de ovăz agar timp de 7 zile, după care zoosporangia a fost spălată cu apă distilată sterilă. Concentrația inoculului a fost de 5-7 zoospori în câmpul vizual al microscopului la o mărire de 80x. Fiecare frunză a fost infectată cu o picătură dintr-o suspensie mixtă de izolate de zoosporangie izolate tip A1 și A2.
În toate experimentele, s-au folosit 3 frunze de cartof pe variantă. După incubare timp de 20 de zile la 18 ° C, fiecare frunză a fost omogenizată într-un mortar cu 2 ml de apă distilată. Din suspensia rezultată, au fost prelevate 3 probe, din care s-au preparat preparate pentru microscopie.
În fiecare variantă, au fost examinate 180 de câmpuri vizuale, după care numărul de oospori a fost recalculat la 1 mm2 suprafața foii. Rezultatele numărării pentru fiecare variantă au fost mediate.
Pentru a calcula intervalul de încredere (μ) pentru un nivel de semnificație de 0,05, a fost utilizată următoarea formulă
unde s este deviația standard, n este numărul de măsurători, t este constanta testului t pentru un nivel de semnificație de 0,05. Toate calculele au fost efectuate în Excel (pachetul Microsoft Office).
rezultate si discutii
Inocularea frunzelor colectate din diferite straturi ale unui tufiș de cartofi și plasate în aceleași condiții în camere umede a relevat diferențe în intensitatea formării oosporilor. În toate soiurile studiate, numărul maxim de oospori s-a format în timpul inoculării frunzelor colectate din nivelurile inferioare și medii ale tufișului. Nu s-au găsit diferențe semnificative în formarea oosporilor în frunzele inferioare și medii.
Numărul minim de oospori s-a format în frunzele stratului superior (Fig. 1).
În frunzele nivelurilor inferioare și medii, numărul maxim de oospori s-a format la soiurile Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar și Osiris. S-au format oarecum mai puțin intens în frunzele soiului Yanka. Numărul maxim de oospori din frunzele stratului superior a fost observat la frunzele soiului Uladar, apoi Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky și Sandrin au mers în ordine descrescătoare; cu toate acestea, nu toate diferențele au fost semnificative statistic.
Figura: 1. Formarea oosporilor în frunzele diferitelor straturi ale tufișului de cartofi. Cele inferioare sunt frunzele celor trei niveluri inferioare ale tufișului, cele superioare sunt 3-4 frunze complexe din vârful plantei, cele din mijloc sunt din mijlocul tufișului.
Barele de eroare arată intervalul de încredere pentru un nivel de semnificație de 0,05.
În teren, condițiile microclimatice contribuie, de asemenea, la formarea de oospori în frunzele inferioare și medii ale tufișului: umiditate mai mare, insolație solară redusă și fluctuații zilnice de temperatură (Harrison, 1992). Pulverizarea superioară are ca rezultat mai puține pesticide în fundul și centrul tufișului. Pentru a reduce formarea de oospori, ar trebui folosite tehnologii care să permită administrarea cu succes de fungicide în părțile inferioare și medii ale tufișului. Rezultate bune pot fi obținute folosind pulverizatoare de aer turbulente și fungicide sistemice care se pot răspândi în părțile netratate ale tufișului.
Această lucrare a fost susținută de Russian Science Foundation (proiectul nr. 14-50-00029).
Articolul a fost publicat în revista „Protecția cartofului” (nr. 2, 2015)